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金銀花有效成分提取

瀏覽:1048次 時間:2019-04-18 08:21:36

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金銀花除含有綠原酸和異綠原酸外,還含有環烯醚萜甙裂環馬錢素、獐牙菜甙、馬錢素、馬錢酸、新環烯醚萜甙;常春藤皂甙配基、齊墩果酸;川續斷皂甙乙;黃褐毛忍冬甙甲、α-常春藤皂甙、無患子皂甙B、灰氈毛忍冬皂甙甲、灰氈毛忍冬皂甙乙、灰氈毛忍冬次皂甙甲、灰氈毛忍冬次皂甙乙等。揮發油主要含芳樟醇、雙花醇、香葉醇、β-苯乙醇、苯甲醇、異雙花醇、α-松油醇、丁香油酚等30多種成分。?

傳統經驗及近代藥理實驗和臨床應用都證明,金銀花對于多種致病菌有較強的抗菌作用和較好的治療效果。

金銀花的主要抗菌有效成分為綠原酸和異綠原酸。它們是奎寧酸和咖啡酸的酯。中藥制劑,制備金銀花提取物多采用水提、水提醇沉和稀醇提取。也有用水煎后加石灰乳使綠原酸類成分沉淀,然后加稀酸分解得提取物的方法。提取方法 :

1.稀醇提取法 生藥用10倍量和8倍量70%乙醇提取2次,每次2h。提取液過濾,減壓濃縮,抽干。

2.水提法 生藥用10倍和8倍量水煎煮2次,每次2h,合并提取液,過濾濃縮至干。

3.水提醇沉法 按水提法提取,濃縮至1∶1時,加乙醇至含醇量達75%,靜置,過濾,減壓濃縮抽干。

4.超濾方法 稱取干燥金銀花一定量,加入10倍量水沸騰煎煮2次,每次1小時,過濾,擠壓藥渣,合并藥液,離心,量上清液體積。取出1克金銀花的藥液,以測量原液中綠原酸含量。

將待超濾溶液倒入儲液罐,連接超濾器進行超濾。控制一定的壓力,至超濾液的體積占原體積的85%左右時,加入相當于原體積15%的水至儲液罐中,繼續超濾,至超濾液與原體積相同時,取樣(為等體積超濾液)待測含量。往儲液罐中加入相當于原來體積25%的水,繼續超濾,至超濾液相當于加入的水量時,取樣(為1.25倍體積超濾液)待測含量。同法繼續超濾,得到1.5倍、2倍和3倍體積的超濾液。

1.紫外分光光度法 (1)如新鮮植物中含有多元酚氧化酶,則先在100℃加熱1小時,或浸在1%亞硫酸氫鈉溶液中,然后在石英砂中磨碎,用70%乙醇提取3次(總體積≈10倍樣品),提取液于40℃-50℃減壓濃縮至原體積的1/10,再用紙層析分離。吸取此液0.01毫升點在whatman No.1濾紙上,用丁醇-甲醇-水(4∶1∶5)的水相蒸氣飽和過夜(20℃),次日,再用丁醇相下行展開8小時,取出,揮去溶劑后,綠原酸在紫外燈下顯暗藍色熒光,Rf值為0.73,如用氨氣熏則變為綠黃色,如噴Hoffners試劑(1%亞硝酸鈉的1%甲醇溶液),斑點則變為黃色,如噴1N氫氧化鈉溶液則變為紅色。綠原酸的定量則不噴亞硝酸鈉溶液及氫氧化鈉溶液,可從紙上洗脫,用紫外分光光度計定量。

(2)生藥0.5克,用70%乙醇在50℃條件提取(5?0毫升),取提取液0.2毫升點在濾紙上,于暗處用丁醇-醋酸-乙酸丁酯-水(9∶28∶47∶16)層析18小時,在紫外燈下檢出綠原酸,用70%乙醇10毫升洗脫,在波長324nm處測吸收度。

(3)紙層析法,用正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)在19℃展開26小時而分開,斑點用等量10%醋酸溶液及1%亞硝酸鈉溶液噴霧而顯色,綠原酸(黃色)的Rf值為0.50。如用氫氧化鈉溶液噴霧,綠原酸變為紅色。綠原酸的定量是將相應的斑點用異丙醇或甲醇或水洗脫,在波長327nm測量吸收度。

(4)取生藥于60℃烘至恒重,稱取1克,置于瓶中,加95%乙醇25毫升,在80℃水浴上提取1小時。傾出提取液,再加95%乙醇25毫升,重復提取。合并兩次提取液,稀釋至一定濃度,在波長324nm處測吸收度,用下面公式計算生藥中綠原酸的含量。

綠原酸含量%=E?稀釋倍數K?樣品量(毫克)?00?00%

E為吸收度,K為測定常數。用綠原酸純品測繪標準曲線,按E=KCL的公式(C為標準液濃度,單位為毫克/100毫升,L為比色杯厚度,1厘米),求得常數K為0.479。用此法分析了從各地藥材公司收集的金銀花樣品中綠原酸的含量。

(5)生藥粉1克,用70%甲醇提取24小時(室溫、暗處)或水浴80℃提取1小時,取部分提取液加于含有2克聚酰胺粉的小柱,用水、稀甲醇溶液洗脫柱子,綠原酸可用0.02%氫氧化鈉的70%甲醇溶液洗脫,再用70%甲醇稀釋至一定體積,在波長324nm測吸收度,與標準品比較而定量

2.容量法 (1)碘量法 綠原酸易吸附在wofatit L150上,可從混合物中分離,然后用0.1N鹽酸溶液或稀硫酸洗脫,用碘量法滴定,如用3N氫氧化鈉溶液洗脫則綠原酸被部分地分解成咖啡酸及奎尼酸,但并不影響結果。

(2)非水滴定 綠原酸在乙腈-甲酸(3∶1)混合液中可被醋酸銅氧化成相應的鄰醌(o-quinone),此反應可用于植物樣品中酚類化全物的氧化滴定。


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